Personal Details

Den Studierenden wird in dieser Lehrveranstaltung die Theorie grundlegender proteinchemischer Techniken vermittelt. Eine präparative Reinigung von Proteinen wird durchgeführt, Proteine werden analytisch nachgewiesen, enzymkinetische Methoden und die ersten Schritte einer Proteomanalyse werden durchgeführt. Die Auswertung und Interpretation biochemischer Versuchsdaten und die Darstellung dieser wissenschaftlichen Daten werden vermittelt.

Folgende praktische Laborbeispiele werden von den Studierenden durchgeführt:

Enzymkinetik: Photometrie, Lambert-Beer'sches Gesetz, Michaelis-Menten-Kinetik, direkte Darstellung der Daten, Lineweaver-Birk Diagramm, Einfluss von Inhibitoren auf die kinetischen Konstanten Km und Vmax, Hemmtypen, Ermittlung von IC50-Werten.

Proteinchemische Methoden zur präparativen Enzymreinigung und für die erste Phase einer Proteom-Analyse: Herstellung von Puffern, Zellaufschluss-Methoden (Mixer, Douncer), Zellfraktionierung, reversible und irreversible Fällung von Proteinen (Ammoniumsulfat, Hitze, Säure), Zentrifugation, Dialyse, Ionenaustausch-Chromatographie, direkter und indirekter Enzymtest, quantitative Protein-Bestimmung (Bradford), elektrophoretische Techniken (SDS-PAGE für Reinheitskontrolle und Molekulargewichtsbestimmung von Proteinen mittels Rf-Werten; 2D-Elektrophorese; Coomassie Blue und Silberfärbung).

Erstellung einer Reinigungstabelle.

Art der Protokollführung: Drei Versuche, pro Versuch jeweils ein Protokoll in Form einer wissenschaftlichen Publikation - Abstrakt, Einleitung, M&M, Resultate, Diskussion, Literatur.

Vortrag, Aktivierende Methoden, Gruppenarbeit, Praktische Übung

Endprüfung

30% schriftliche Prüfung über den theoretischen Hintergrund zu Beginn des Praktikums,

40% Beurteilung der mündlichen und praktischen Mitarbeit im Labor,

30% Beurteilung des Protokolls

- Objective: Estimate the toxicological and therapeutic potential of a small molecule drug using cell-based test systems.

- Focus Areas:

- Analyse the small molecule's activation potential on the heat shock response pathway.

- Assess possible cytotoxic effects in a concentration-dependent manner.

- Assays and Methods Available:

- Luciferase reporter assays

- Western blot

- qPCR

- Flow cytometry

- ELISA

- General viability assays

- Student Role: Select and apply suitable methods from the provided options.

Practical course with independent performance of the experiments

Immanente Leistungsüberprüfung

Entry exam on the computer (multiple choice), evaluation of performance in the lab, protocol